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蛋白質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定粗蛋白質(zhì)的應(yīng)用
來(lái)源: http://www.petseason.cn/ 類別:技術(shù)文章 更新時(shí)間:2014-08-08 閱讀次
凱氏定氮法是目前國(guó)家測(cè)定糧食、油料、飼料等粗蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)方法。是先測(cè)定出樣品中的含氮量,再乘以蛋白子換算系數(shù)。在測(cè)定過(guò)程中需用已知含氮量的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)做對(duì)照試驗(yàn)經(jīng)常用無(wú)水硫酸按,其含氮量為21.19%,但由于系統(tǒng)誤差的存在,測(cè)定值與實(shí)際含氮量之間總是要存在一些誤差。通過(guò)多年的試驗(yàn)對(duì)比,計(jì)算氮的回收率,再將其與蛋白質(zhì)的測(cè)定.計(jì)算結(jié)合起來(lái),能有效地解決這一問(wèn)題。蛋白質(zhì)測(cè)定儀也是對(duì)蛋白質(zhì)含量進(jìn)行測(cè)定的主要儀器,能夠十分準(zhǔn)確。
首先,按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,稱取0.2g硫酸按唯確至O.OOOlg)按照粗蛋白質(zhì)的測(cè)定步驟作對(duì)照試驗(yàn),按下式計(jì)算含氮量:N%)=c菠、一:}x14x共x100.········…...}1}式中:N—實(shí)測(cè)含氮量,%;vi—滴定樣液時(shí)消耗鹽酸溶液體積,ml;:!瞻自囼(yàn)消耗鹽酸溶液的體積,ml;—鹽酸溶液的濃度,mol/1;—硫酸按溶解后定容的體積,ml:‘—蒸餾時(shí)吸取硫酸按溶液的體積,ml;、—硫酸按的質(zhì)量,mgo然后,按下式計(jì)算回收率:R%=21.19x100%,將2)式變形為:NR%=21.19,從3)式可以得出:1i)將測(cè)定值用回收率加以校正,即可得到實(shí)際值;诖擞^點(diǎn),將4>式兩邊同時(shí)除以R%,有:NR%(一,x14xv,xv半R%=21.19,4)式中:!龢(biāo)定的鹽酸溶液的濃度;R%—待測(cè)定的回收率。
在整個(gè)蛋白質(zhì)測(cè)定儀試驗(yàn)過(guò)程中,若使用同一套凱氏定氮裝置,保持同一操作條件,使用同一批次配制的鹽酸溶液,則可以認(rèn)為二“%保持不變,因“匕可以把cR%看作一個(gè)常數(shù)k,此時(shí),4)式可化為:k(v}一。)x14xv,xv半=21.19式中:v,Iv}IvIv'1、在試驗(yàn)中均為已知或可知值,因此,只需求出k值即可。在將k代入粗蛋白質(zhì)計(jì)算公式,這樣,粗蛋白質(zhì)的計(jì)算公式為:粗蛋白質(zhì)汗基,%)=k(v}-vo)x14xPx于x10000,w(100-M)式中—實(shí)驗(yàn)用去的鹽酸溶液體積,ml;—空白試驗(yàn)用去的鹽酸溶液體積,ml;:—試樣消化后定容的體積,ml:‘—蒸餾時(shí)取用稀釋的消化液的體積,mlP—蛋白質(zhì)換算系數(shù);—試樣重量,mg;M—試樣水分百分率,%。
通過(guò)蛋白質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定的結(jié)果論證,可以總結(jié)出:將回收率與蛋白質(zhì)的測(cè)定結(jié)合在一起,能最大限度地減免系統(tǒng)誤差,同時(shí),鹽酸溶液的濃度也不需標(biāo)定,因此,整個(gè)測(cè)定過(guò)程更簡(jiǎn)捷更準(zhǔn)確。
首先,按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,稱取0.2g硫酸按唯確至O.OOOlg)按照粗蛋白質(zhì)的測(cè)定步驟作對(duì)照試驗(yàn),按下式計(jì)算含氮量:N%)=c菠、一:}x14x共x100.········…...}1}式中:N—實(shí)測(cè)含氮量,%;vi—滴定樣液時(shí)消耗鹽酸溶液體積,ml;:!瞻自囼(yàn)消耗鹽酸溶液的體積,ml;—鹽酸溶液的濃度,mol/1;—硫酸按溶解后定容的體積,ml:‘—蒸餾時(shí)吸取硫酸按溶液的體積,ml;、—硫酸按的質(zhì)量,mgo然后,按下式計(jì)算回收率:R%=21.19x100%,將2)式變形為:NR%=21.19,從3)式可以得出:1i)將測(cè)定值用回收率加以校正,即可得到實(shí)際值;诖擞^點(diǎn),將4>式兩邊同時(shí)除以R%,有:NR%(一,x14xv,xv半R%=21.19,4)式中:!龢(biāo)定的鹽酸溶液的濃度;R%—待測(cè)定的回收率。
在整個(gè)蛋白質(zhì)測(cè)定儀試驗(yàn)過(guò)程中,若使用同一套凱氏定氮裝置,保持同一操作條件,使用同一批次配制的鹽酸溶液,則可以認(rèn)為二“%保持不變,因“匕可以把cR%看作一個(gè)常數(shù)k,此時(shí),4)式可化為:k(v}一。)x14xv,xv半=21.19式中:v,Iv}IvIv'1、在試驗(yàn)中均為已知或可知值,因此,只需求出k值即可。在將k代入粗蛋白質(zhì)計(jì)算公式,這樣,粗蛋白質(zhì)的計(jì)算公式為:粗蛋白質(zhì)汗基,%)=k(v}-vo)x14xPx于x10000,w(100-M)式中—實(shí)驗(yàn)用去的鹽酸溶液體積,ml;—空白試驗(yàn)用去的鹽酸溶液體積,ml;:—試樣消化后定容的體積,ml:‘—蒸餾時(shí)取用稀釋的消化液的體積,mlP—蛋白質(zhì)換算系數(shù);—試樣重量,mg;M—試樣水分百分率,%。
通過(guò)蛋白質(zhì)測(cè)定儀測(cè)定的結(jié)果論證,可以總結(jié)出:將回收率與蛋白質(zhì)的測(cè)定結(jié)合在一起,能最大限度地減免系統(tǒng)誤差,同時(shí),鹽酸溶液的濃度也不需標(biāo)定,因此,整個(gè)測(cè)定過(guò)程更簡(jiǎn)捷更準(zhǔn)確。
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