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校驗(yàn)黃曲霉素測(cè)定儀的技術(shù)方法
黃曲霉毒素具有很強(qiáng)的毒性,能夠破壞人和動(dòng)物的肝臟組織,目前AFB1測(cè)定方法包括:薄層色譜法、微柱篩選法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫吸附法等,其中薄層色譜法、微柱篩選法、高效液相色譜法對(duì)應(yīng)的檢測(cè)儀器為薄層色譜儀、紫外光燈、液相色譜儀等,具有相應(yīng)的國(guó)家檢定規(guī)程,而酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)應(yīng)的黃曲霉毒素測(cè)定儀沒(méi)有檢定規(guī)程或校準(zhǔn)規(guī)范。LISA測(cè)定AFB1具有技術(shù)先進(jìn)、靈敏度高、特異性強(qiáng)、精確度高、重復(fù)性好、測(cè)定速度快、成本低、污染少、一次可測(cè)定大批樣品、能限量和定量測(cè)定等優(yōu)點(diǎn)。
黃曲霉素測(cè)定儀主要應(yīng)用于食品和飼料產(chǎn)品中AFB1的檢測(cè),由光源、單色器(干涉濾片)、樣品池、檢測(cè)器(硅光電池)和A/D轉(zhuǎn)換器等組成。
在日常的檢定或校準(zhǔn)中,由于缺乏可依據(jù)的檢定規(guī)程或校準(zhǔn)規(guī)范等技術(shù)性文件,使得黃曲霉毒素測(cè)定儀計(jì)量特性技術(shù)指標(biāo)處于失控狀態(tài),影響了儀器計(jì)量性能的溯源性和儀器的準(zhǔn)確性。儀器測(cè)量顯示值為吸光度值,可選用光譜中性濾光片對(duì)儀器的吸光度測(cè)量值進(jìn)行校準(zhǔn)。光譜中性濾光片吸光度標(biāo)稱(chēng)值應(yīng)分別約為0.2、0.5、1.0、1.5,并在450nm、490nm波長(zhǎng)下定值,其擴(kuò)展不確定度不大于0.010(k=2)。儀器干涉濾光片可產(chǎn)生特定波長(zhǎng)的單色光,干涉濾光片峰值的波長(zhǎng)準(zhǔn)確性可用I級(jí)或II級(jí)分光光度計(jì)進(jìn)行定值。
基于酶聯(lián)免疫吸附法的黃曲霉素測(cè)定儀的校準(zhǔn)技術(shù),實(shí)踐證明該方法簡(jiǎn)便易行,能夠?qū)崿F(xiàn)干涉濾光片峰值波長(zhǎng)誤差,吸光度的零點(diǎn)漂移、示值穩(wěn)定性、示值誤差、示值重復(fù)性等黃曲霉素測(cè)定儀計(jì)量性能指標(biāo)的綜合評(píng)價(jià),各指標(biāo)能做到有效溯源。依據(jù)提出的校準(zhǔn)方法,對(duì)外開(kāi)展黃曲霉素測(cè)定儀測(cè)試業(yè)務(wù),先后在數(shù)十臺(tái)洗板機(jī)上進(jìn)行了校準(zhǔn),獲得了滿(mǎn)意的效果。
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