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通過桑果組培研究植物組培技術

來源:  類別:技術文章  更新時間:2013-01-19  閱讀
  桑樹是多年生木本植物,屬于落葉樹種,主要分布于溫帶和亞熱帶地區(qū)。我國果桑主要分布在江蘇、廣東、廣西、湖北、陜西等地。但規(guī)模都不大,一般每個種植地不超過33 hm²畝。現(xiàn)有果桑品種十幾個。從遺傳方面來講,有二倍體(2n)、三倍體(3n)、四倍體(4n)。產(chǎn)量2 250 kg/ hm² , 7 500~11 250 kg/ hm²、30 000 kg/ hm²。桑苗繁殖的方法很多,大體上分為有性繁殖和無性繁殖兩大類。
  嫁接法、扦插法,一是速度慢,二是質量差,不能脫毒,且易感病毒病。近20余年,隨著生物技術的不斷完善和提高,利用組織培養(yǎng)快速繁殖并產(chǎn)生大量脫毒苗,以解決某些植物的退化,提高果實產(chǎn)量和質量,應用于生產(chǎn),為加速培養(yǎng)桑樹優(yōu)良品種開辟出新途徑。果桑不但桑果產(chǎn)量高、而且桑葉的質量、產(chǎn)量與湖桑(普通養(yǎng)蠶用桑樹)相當。因此既可發(fā)展養(yǎng)蠶業(yè),又可收獲桑果。鮮桑果可以直接供應市場,也可加工成桑果汁、桑果醬、釀成桑果酒,制成桑仁糕,還可以提煉食用色素、醫(yī)用黃酮等醫(yī)藥產(chǎn)品。香港雜志把果桑稱謂第三代流行果品之一。
  1 材料和方法
  1. 1 材料的選擇和處理
  取健壯枝條的頂芽或側芽,剪除葉片,用無菌水擦洗干凈,在無菌條件下,用0.1%的升汞溶液浸泡消毒10min,無菌水沖洗3~4次,將處理過的組織放入組培培養(yǎng)室中開始培養(yǎng)。
  1.2 接種
  在無菌條件下,將頂芽或側芽切成3~5mm長的段,剝去莖尖外部鱗片和小葉,接種到培養(yǎng)基上,每瓶接5~7段。
  1. 3 培養(yǎng)
  將頂芽或莖段,接種在MS + 0.5mg/L BA + 0. lmg/L NAA + 0. lmg/L GA培養(yǎng)基中培養(yǎng),附加3%蔗糖,用0.5%瓊脂固化。在溫度25℃左右和光照下,5d后長出單生芽,4周后小芽長到1 cm并產(chǎn)生叢生苗。
  將叢生苗分割接種在MS + 2mg/L BA + 0.5mg/L GA培養(yǎng)基中,附加蔗糖3% ,0.5%瓊脂固化。
  經(jīng)培養(yǎng)小苗長到3~5cm高時,可以從節(jié)間處,將其切成小段進行繼代培養(yǎng),側芽萌動,迅速生長。1個月可長到3~5cm高,繼代培養(yǎng)可使側芽苗不斷增殖,從而獲得大量可供繁殖的試管苗。
  切下帶頂芽的苗,插在1/2MS+1mg/L GA + 2%蔗糖的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。約4、5周后,在自然光照下,生根發(fā)育成完整植株,供移栽。
  3 結果與討論
  本材料為雙子葉植物,在培養(yǎng)過程中,我們發(fā)現(xiàn)在莖段的切口特別是基部切口上會長出類似愈傷組織的褐化物,且不斷膨大,直至將底部包圍。這樣從頂芽開始逐漸枯黃、萎縮,造成培養(yǎng)失效。因此,建議在培養(yǎng)基中加入適量的活性炭等吸收劑吸附部分褐化物質,也可用頻繁轉移到新鮮培養(yǎng)基上或用切除褐化組織的方法加以防止,有一定效果。
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