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雙波長法測定直鏈淀粉含量
雙波長法測定直鏈淀粉含量
因為支鏈淀粉也會與碘形成絡(luò)合物,這種絡(luò)合物會和直鏈淀粉-碘復合物吸收相同波長的光,從而導致測定的直鏈淀粉含量比真實值要高。另外,單波長法只能測定谷物中直鏈淀粉含量,而糧食的食味品質(zhì)還與支鏈淀粉的含量及直鏈淀粉和支鏈淀粉的比例有關(guān)。運用雙波長法可以同時獲得直鏈淀粉、支鏈淀粉和總淀粉含量3個指標,省時又省力,工作效率高,適用于大批量分析。下面我們通過對雙波長法測定原理,以及與用直鏈淀粉含量儀測定直鏈淀粉含量作比較,來深入了解雙波長法。
雙波長比色法原理:如果溶液中某溶質(zhì)在兩個波長處均有吸收,則兩個波長的吸光度差值與溶質(zhì)濃度成正比。用與待測樣品相應(yīng)的標準品配制的直鏈淀粉和支鏈淀粉的標準溶液分別與碘反應(yīng),然后在同一個坐標系里進行掃描(400~960nm)或作吸收曲線,作圖確定直鏈淀粉的測定波長和參比波長λ2、λ1,支鏈淀粉的測定波長和參比波長λ4、λ3。再將待測樣品與碘顯色,在選定的波長處作4次比色,然后利用直鏈淀粉和支鏈淀粉標準曲線即可分別求出樣品中兩類淀粉的含量。因測定的是試樣在兩波長處的吸光度差值,扣除了兩類淀粉吸收背景的相互影響,故可提高測定的靈敏度和選擇性。當然我們還需利用直鏈淀粉測定儀測定的結(jié)果來進行比較,以此確定雙波長法的精確度。
戴雙等通過單波長法和雙波長法對小麥直、支鏈淀粉含量測定進行了比較,結(jié)果表明,雙波長法可以有效地排除其他物質(zhì)的干擾,測定結(jié)果優(yōu)于單波長法。范明順等采用雙波長法得到的直鏈淀粉的回收率為95.0%~101.7%,支鏈淀粉的回收率為98.8%~103.2%,表明雙波長法測定的結(jié)果重現(xiàn)性較好,相對標準偏差小于1%。另外,如果想要更加快捷、方便的測定直鏈淀粉的含量,我們可以通過直鏈淀粉分析儀來進行測定。
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