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多通道農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀
來(lái)源: 本站 類別:技術(shù)文章 更新時(shí)間:2013-10-10 閱讀次
1 前言
隨著人們生活水平的提高,人們的視線已從“吃得飽”轉(zhuǎn)移到“吃的安全、吃的放心”,對(duì)食品安全注重的程度日益提高。其中食品中農(nóng)藥殘留也日益成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。為了保護(hù)消費(fèi)者的身體健康,我國(guó)農(nóng)藥殘留強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)GB2763-2005《食品中農(nóng)藥最大殘留限量》對(duì)農(nóng)藥殘留也做出了明確的規(guī)定。農(nóng)藥是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中必不可少的生產(chǎn)資料,對(duì)預(yù)防病蟲(chóng)害、保障農(nóng)作物高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)等起到重要的作用。但農(nóng)藥也是一把雙刃劍,在為社會(huì)創(chuàng)造價(jià)值的同時(shí),也對(duì)社會(huì)造成了一定的危害。過(guò)量農(nóng)藥的噴灑以及蔬菜、瓜果未在安全間隔期內(nèi)施藥或未度過(guò)安全期的采摘,都會(huì)造成農(nóng)藥在蔬菜、瓜果等食品中的大量殘留。長(zhǎng)期食用此類食物會(huì)造成農(nóng)藥在人體內(nèi)的積蓄進(jìn)而引起中毒。與此同時(shí),大量農(nóng)藥的噴灑也造成環(huán)境的污染、破壞生態(tài)平衡。
我國(guó)作為農(nóng)業(yè)大國(guó),同時(shí)也是生產(chǎn)和消費(fèi)農(nóng)藥的大國(guó)。我國(guó)農(nóng)藥的年總產(chǎn)量已經(jīng)超過(guò)30萬(wàn)噸,位于世界前列。根據(jù)農(nóng)藥的結(jié)構(gòu),可將農(nóng)藥分為:有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯、三嗪除草劑類等農(nóng)藥。其中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥是我國(guó)目前使用量最大的農(nóng)藥,占整個(gè)農(nóng)藥使用量的70%,且多噴灑在蔬菜、瓜果的表面,很容易被人們攝入。高含量的有機(jī)磷農(nóng)藥可導(dǎo)致急性中毒事件,低濃度農(nóng)藥長(zhǎng)期攝入也會(huì)引起神經(jīng)傳導(dǎo)阻礙、神經(jīng)麻痹乃至死亡。目前,國(guó)家推薦的檢測(cè)方法為氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法、液相色譜-質(zhì)譜法等。上述方法所采用的儀器均為高精端儀器,購(gòu)置和維護(hù)成本較高,需專門的技術(shù)人員進(jìn)行操作。對(duì)于地域遼闊、農(nóng)作物品種豐富的中國(guó),采用上述儀器對(duì)農(nóng)藥殘留進(jìn)行檢測(cè)顯得力不從心。而一些小型儀器更受到實(shí)驗(yàn)室人員的青睞,如:測(cè)土儀或者土壤養(yǎng)分測(cè)定儀。測(cè)土儀是測(cè)定土壤中氮、磷的含量,由此可推斷出施肥量的多少。因此,根據(jù)農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)而建立農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀檢測(cè)果蔬食品中農(nóng)藥殘留,是保障提高市場(chǎng)準(zhǔn)入制度的有力武器。
2 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀的原理、特點(diǎn)及分類
2.1 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法—酶抑制率法
酶抑制率法是利用有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的毒理特性而建立的一種生物技術(shù)。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥可特異性的抑制昆蟲(chóng)中的乙酰膽堿酯酶,從而引起昆蟲(chóng)中神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿的積累,造成昆蟲(chóng)神經(jīng)功能的紊亂甚至引起死亡。根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶的特異性反應(yīng)(正是由于此特性,該法只能對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥進(jìn)行測(cè)量),向農(nóng)藥提取物中加入乙酰膽堿酯酶(AchE)、底物(硫代乙酰膽堿,ATCh)和顯色液(二硫代二硝基苯甲酸,DTNB),根據(jù)反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)曲線即可判斷樣品中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留量。其反應(yīng)式為:
從反應(yīng)式可以看出,農(nóng)藥殘留越多,乙酰膽堿酯酶被抑制程度越大,從而生成的黃色化合物越少,反之,生成的黃色化合物越多。在整個(gè)反應(yīng)體系中酶的種類和質(zhì)量是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。動(dòng)物乙酰膽堿酯酶與有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的特異性反應(yīng)最強(qiáng),靈敏度高,干擾小,但國(guó)內(nèi)無(wú)法大批量制備,只能從國(guó)外購(gòu)買。動(dòng)物的丁酰膽堿酯酶與植物來(lái)源的植物酯酶來(lái)源廣、價(jià)格便宜,但靈敏度低、易受干擾。
2.2 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀特點(diǎn)
農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀器旨在能夠現(xiàn)場(chǎng)、快速、準(zhǔn)確、方便地檢測(cè)果蔬等食品中農(nóng)藥殘留量,為果蔬食品的監(jiān)管提供有力的技術(shù)手段,因此儀器本身應(yīng)具有以下特點(diǎn):
(1)測(cè)量準(zhǔn)確,且具有較低檢出限;
(2)不受測(cè)量地點(diǎn)、環(huán)境的影響;
(3)不局限于實(shí)驗(yàn)室內(nèi),應(yīng)適用于野外作業(yè)或流動(dòng)車工作;
(4)操作簡(jiǎn)單,非專業(yè)人員也可操作;
(5)儀器結(jié)構(gòu)應(yīng)模塊化,甚至全固態(tài)化,使用時(shí)不受外界環(huán)境干擾,甚至達(dá)到“免維修”。
2.3 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀的分類
目前,市場(chǎng)上農(nóng)藥殘留的檢測(cè)儀器存在兩種叫法,其一農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀,其二農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀。市售的用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)的快速檢測(cè)儀大多是基于酶抑制率法而建立。酶抑制率法從本質(zhì)上說(shuō)是評(píng)價(jià)農(nóng)藥的毒性,即使農(nóng)藥(如敵敵畏和甲胺磷)的濃度相同,對(duì)酶的抑制作用也不同,因此筆者更傾向于第二種叫法。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀按通道類型分為:?jiǎn)瓮ǖ篮投嗤ǖ;按儀器類型分為:陣列式和掃描式;從單色裝置分為:固態(tài)發(fā)光器件、濾光片和光柵式。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀主要由光源系統(tǒng)、分光系統(tǒng)、培養(yǎng)顯色系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)及與儀器配套的試劑盒等構(gòu)成。以GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀為例,儀器由超高亮度硅光光源、培養(yǎng)顯色一體化比色池、集成光電傳感器、溫度傳感器、微處理器和打印機(jī)構(gòu)成,該儀器屬多通道、陣列、固態(tài)發(fā)光器件式農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀。超高亮硅光二極管既作光源又做單色器,使用壽命可達(dá)10萬(wàn)h。儀器采用模塊化設(shè)計(jì),具有8個(gè)檢測(cè)通道,采用陣列式檢測(cè)方式。試劑盒中酶試劑為進(jìn)口試劑且采用雙重保護(hù)技術(shù),保證了測(cè)量的準(zhǔn)確度和靈敏度。市場(chǎng)上還存在一種掃描、濾光片、光柵式農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀,主要由鎢燈、濾光片(或光柵)、檢測(cè)器等構(gòu)成。與超高亮硅光二極管相比,鎢燈作為光源價(jià)格比較昂貴且使用壽命短,與此同時(shí),還需增加分光系統(tǒng)。儀器來(lái)回搬動(dòng)過(guò)程中很容易造成儀器光學(xué)系統(tǒng)的損壞。因此,該類型儀器與固態(tài)發(fā)光器件式檢測(cè)儀器相比,購(gòu)置和維護(hù)成本較高,在現(xiàn)場(chǎng)或流動(dòng)車中適用性較差。
3 農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀的分析步驟
以GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀為例,介紹農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀的分析步驟。
3.1 儀器
GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀、GDYQ-701S樣品提取儀、便攜式電子臺(tái)秤、其他配件(附在農(nóng)藥殘毒檢測(cè)箱內(nèi))。
3.2 試劑
(1)農(nóng)殘?jiān)噭?
將農(nóng)殘?jiān)噭?固體試劑全部倒入500mL塑料方瓶中,然后加入500mL蒸餾水(或純凈水)使之溶解并搖勻(或用蒸餾水稀釋至500mL塑料方瓶標(biāo)簽指示的刻度線處使之充分溶解搖勻)即可使用。
(2)農(nóng)殘?jiān)噭?
將農(nóng)殘?jiān)噭?真空玻璃瓶(溶質(zhì))尖端用小砂輪片劃一下并打開(kāi),將隨注射器所帶的長(zhǎng)針頭安裝到1mL注射器上,用此1mL注射器將瓶?jī)?nèi)的溶液全部取出并注入標(biāo)有農(nóng)殘?jiān)噭?的塑料滴甁中,然后將農(nóng)殘?jiān)噭?/DIV>
2塑料滴管尖端(溶劑)剪開(kāi),將塑料滴管中的溶液全部滴入標(biāo)有農(nóng)殘?jiān)噭?的塑料滴甁中。然后蓋緊滴瓶瓶蓋搖勻,備用(真空玻璃瓶與塑料滴管中溶液轉(zhuǎn)移前應(yīng)將尖端處溶液用手指彈下再打開(kāi)與剪開(kāi),轉(zhuǎn)移后應(yīng)用混合液反復(fù)潤(rùn)洗真空玻璃瓶與塑料滴管和注射器內(nèi)壁2次)。
(3)農(nóng)殘?jiān)噭?
將農(nóng)殘?jiān)噭?塑料滴管剪開(kāi)并將滴管中的固體試劑全部洗入到標(biāo)有農(nóng)殘?jiān)噭?的25mL塑料方瓶溶液中,蓋緊瓶蓋,搖動(dòng)使之充分溶解混勻即可使用。
(4)農(nóng)殘?jiān)噭?
將農(nóng)殘?jiān)噭?塑料滴管剪開(kāi)并將滴管中的固體試劑全部洗入到標(biāo)有農(nóng)殘?jiān)噭?的25mL塑料方瓶溶液中,蓋緊瓶蓋,搖動(dòng)使之充分溶解混勻即可使用。
(5)有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品。
(6)去離子水或蒸餾水。
3.3 操作流程
農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀分析步驟主要包括農(nóng)藥提取、培養(yǎng)、顯色、測(cè)量等,如圖1所示。
第1步:用隨機(jī)所帶的感量為0.01g電子臺(tái)秤稱取具有代表性樣品2.0g于樣品提取瓶中,加入提取試劑在GDYQ-701S樣品提取儀中超聲提取3min;
第2步:取提取后試劑,加入試劑2、試劑3,在GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀中培養(yǎng)10min;
第3步:加入試劑4 100μL,在GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀中顯色3min;
第4步:儀器根據(jù)自身記錄的酶催化動(dòng)力學(xué)曲線,自動(dòng)給出樣品中農(nóng)藥殘留對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制率。
3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.4.1 農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀與隨機(jī)試劑適配的靈敏度考察了各種農(nóng)藥在不同抑制率條件下的檢出濃度,如表1所示。從表1可知,GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀對(duì)各種農(nóng)藥的檢出限完全符合G B /T5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)—酶抑制率法(分光光度法)的技術(shù)指標(biāo)。
3.4.2 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀通道一致性考察了GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)品在不同抑制率條件下各通道的一致性,結(jié)果如表2所示。由表2可知,儀器各通道之間具有良好的一致性。
3.4.3 農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀的重復(fù)性以甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液為待測(cè)樣品,考察了其抑制率為60%時(shí)測(cè)量的重復(fù)性,計(jì)算11次的平均值為60.4%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.3%。
3.4.4 實(shí)際樣品的檢測(cè)
對(duì)市售蔬菜進(jìn)行抽樣檢測(cè),并對(duì)檢出抑制率≥取樣(2.0g)提取(3min)培養(yǎng)(10min)顯色(3min)檢驗(yàn)結(jié)果
試劑1 10.0mL
試劑2、試劑3取上清液1.00mL 各100μL 試劑4 100μL
GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀完成50%的30份樣品用氣相色譜法進(jìn)行復(fù)檢。結(jié)果表明對(duì)于30份樣品,GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀的檢測(cè)結(jié)果與氣相色譜法檢測(cè)結(jié)果的符合率為86.6%。
4 農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀的應(yīng)用
4.1 田間地頭
我國(guó)幅員遼闊,農(nóng)副產(chǎn)品的種類較多,生產(chǎn)蔬菜的大型基地較少,還是以小農(nóng)戶生產(chǎn)為主。農(nóng)民對(duì)如何選擇農(nóng)藥的品種、合理的施藥量、施藥次數(shù)、農(nóng)藥的安全間隔期等問(wèn)題不是很了解,往往容易造成農(nóng)藥殘留量超過(guò)國(guó)家限量標(biāo)準(zhǔn)。在開(kāi)展“質(zhì)量和安全年”活動(dòng)過(guò)程中,各省、市、地都積極地采購(gòu)農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀,以確保蔬菜的質(zhì)量安全。例如:山東省壽光市集中為農(nóng)戶采購(gòu)500多臺(tái)GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀,幫助種植大戶建立了蔬菜安全實(shí)驗(yàn)室,確保蔬菜農(nóng)藥殘留量不超標(biāo)。此舉措受到了農(nóng)民的一致好評(píng),農(nóng)民再也不擔(dān)心自己辛辛苦苦種植的蔬菜因農(nóng)藥殘留超標(biāo)而被退回,反而由于控制農(nóng)藥殘留量蔬菜的價(jià)格大幅度提高,農(nóng)民切身感覺(jué)得到了實(shí)惠。
4.2 農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市等農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市是蔬菜進(jìn)入消費(fèi)者的交易平臺(tái),其采購(gòu)和出售蔬菜的質(zhì)量直接影響到消費(fèi)者的身體健康。在提高市場(chǎng)準(zhǔn)入制度的同時(shí),農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀可以說(shuō)為其實(shí)施提供了強(qiáng)有力的技術(shù)保障。目前,在各大超市、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)都建立了自己的食品安全快速檢測(cè)小型實(shí)驗(yàn)室,配備了農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀,有效地確保了蔬菜瓜果的質(zhì)量安全。
4.3 執(zhí)法部門
農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀由于操作簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、適用于現(xiàn)場(chǎng)等特點(diǎn),廣泛的應(yīng)用于工商局、技術(shù)監(jiān)督局稽查大隊(duì)、衛(wèi)生疾控等執(zhí)法部門。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀可以配置于食品安全檢測(cè)車,將實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)移到現(xiàn)場(chǎng),可以在各類農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、專業(yè)批發(fā)市場(chǎng)、超市、副食品商場(chǎng)、酒店等場(chǎng)所流動(dòng)檢測(cè),真正實(shí)現(xiàn)了流通領(lǐng)域農(nóng)藥殘留的動(dòng)態(tài)監(jiān)管。
5 總結(jié)
多通道農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)儀器(以GDYN-308S農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀為例)檢測(cè)靈敏度、準(zhǔn)確度完全符合GB/T5009.199-2003中所規(guī)定的技術(shù)指標(biāo),各通道間具有良好的一致性和重復(fù)性。鑒于該儀器檢測(cè)速度快、操作方便、測(cè)量準(zhǔn)確等特點(diǎn),特別適用于一線監(jiān)測(cè)人員在田間地頭、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市等場(chǎng)合的檢測(cè)。該技術(shù)突破了實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的局限性,樣品無(wú)需運(yùn)送,真正實(shí)現(xiàn)了現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。
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