離心機使用注意事項

    一.離心機在預冷狀態(tài)時，離心機蓋必須關閉，離心結束后取出轉頭要倒置于實驗臺上，擦干腔內余水，離心機蓋處于打開狀態(tài)。

    二.轉頭在預冷時轉頭蓋可擺放在離心機的平臺上，或擺放在實驗臺上，千萬不可不擰緊浮放在轉頭上，因為一旦誤啟動，轉頭蓋就會飛出，造成事故！

    三.轉頭蓋在擰緊后一定要用手指觸摸轉頭與轉蓋之間有無縫隙，如有縫隙要擰開重新擰緊，直至確認無縫隙方可啟動離心機。

    四.在離心過程中，操作人員不得離開離心機室，一旦發(fā)生異常情況操作人員不能關電源POWER），要按STOP。在預冷前要填寫好離心機使用記錄。

    五.不得使用偽劣的離心管，不得使用老化、變形、有裂紋的離心管。

    六.在節(jié)假日和晚間最后一個使用離心機例行安全檢查后方能離去。七.在儀器使用過程中發(fā)生機器故障，部件損壞情況時要及時與技術人員聯(lián)系。

    運行注意事項

為了確保安全和離心效果，儀器必須放置在堅固水平的臺面上，工程塑料蓋門上不得放置任何物品；樣品必須對稱放置，并在開機前確保已擰緊螺母。
使用前應檢查轉子是否有傷痕、腐蝕等現(xiàn)象，同時應對離心杯做裂紋、老化等方面的檢查，發(fā)現(xiàn)有疑問立即停止使用，并與廠方聯(lián)系；開機運轉前請務必擰緊轉頭的壓緊螺帽，以免高速旋轉的轉頭飛出造成事故。
轉速設定不得超過最高轉速，以確保機器安全運轉。
使用中如果出現(xiàn)0.00或其他數(shù)字，機器不運轉，應關機斷電，10秒后重新開機，待所設轉速顯示后，再按運轉鍵，機器將照常運轉。
如需分離樣品的比重超過1.2克/立方厘米，最高轉速N必須按下式修正：N=NMAX＊（1.2/樣品比重）1/2，NMAX=轉子極限轉速。
不得在機器運轉過程中或轉子未停穩(wěn)的情況下打開蓋門，以免發(fā)生事故。
離心杯必須等量灌注樣品，切不要使轉頭在不平衡的狀況下運行。
離心機一次運行最好不要超過60分鐘。
離心機必須可靠接地；機器不使用，請拔掉電源插頭。
    使用注意事項

    ※1、離心機在運轉時，不得移動離心機。

    ※2、安放離心機的地面應堅實平整，二只調平螺桿調節(jié)使離心機與地面接觸和均勻受力，以免產(chǎn)生振動。

    ※3、離心管加液應稱量平衡，若加液差異過大運轉時會產(chǎn)生大的振動，此時應停機檢查，使加液符合要求，離心

    試管必須成偶數(shù)對稱放入。

    ※4、若運行時有離心試管破裂，會引起較大振動應立即停機處理。

    ※5、每次停機后再開機的時間間隔不得少于5分鐘，以免壓縮機堵轉而損壞。

    ※6、每次離心完成后，必須將轉子取出，否則長時間放在軸上，可能銹死，轉子會取不出而造成離心機整機報廢。

    ※7、電源必須有接地線。

 ※8、本機轉子使用壽命為三年，過期應更換轉子。

    ※9、所有轉子不能超過其最高轉速使用。

離心機是借離心力分離液相非均一體系的設備。根據(jù)物質的沉降系數(shù)、質量、密度等的不同，應用強大的離心力使物質分離、濃縮和提純的方法稱為離心。一般說，離心機轉速在20000r/min以上的稱為超速離心。離心技術，特別是超速離心技術是分子生物學、生物化學研究和工業(yè)生產(chǎn)中不可缺少的手段。
    1924年T.Svedberg和Rinde研制出世界上第一臺渦輪超速離心機以來，發(fā)展非常迅速，現(xiàn)在已廣泛地應用到科學研究和生產(chǎn)的各個領域�，F(xiàn)在離心機轉頭最高轉速已達100000r/min，最大離心力達700000g。

    離心機作為一種手段，具有許多優(yōu)點。例如，超速離心可在低溫下操作，保護了生物大分子的活性。制備型的離心機負載量大，一次可分離提純幾克樣品，比層析、電泳上的樣品量大得多。分析離心機不僅可測物質的分子量，還可檢驗物質的純度、構象、沉降系數(shù)等。因此離心技術在生物學研究中占有重要的地位，是分離、純化細胞、病毒、蛋白、核酸和酶的最方便最有效的工具。

    （二）離心原理

    當含有細小顆粒的懸浮液靜置不動時，由于重力場的作用使得懸浮的顆粒逐漸下沉。粒子越重，下沉越快，反之密度比液體小的粒子就會上浮。微粒在重力場下移動的速度與微粒的大小、形態(tài)和密度有關，并且又與重力場的強度及液體的粘度有關。象紅血球大小的顆粒，直徑為數(shù)微米，就可以在通常重力作用下觀察到它們的

    沉降過程。

    此外，物質在介質中沉降時還伴隨有擴散現(xiàn)象。擴散是無條件的絕對的。擴散與物質的質量成反比，顆粒越小擴散越嚴重。而沉降是相對的，有條件的，要受到外力才能運動。沉降與物體重量成正比，顆粒越大沉降越快。對小于幾微米的微粒如病毒或蛋白質等，它們在溶液中成膠體或半膠體狀態(tài)，僅僅利用重力是不可能觀察到沉降過程的。因為顆粒越小沉降越慢，而擴散現(xiàn)象則越嚴重。所以需要利用離心機產(chǎn)生強大的離心力，才能迫使這些微粒克服擴散產(chǎn)生沉降運動。

    離心就是利用離心機轉子高速旋轉產(chǎn)生的強大的離心力，加快液體中顆粒的沉降速度，把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質分離開。離心力（F）的大小取決于離心轉頭的角速度（ω，r/min）和物質顆粒距離心軸的距離（r，cm）。它們的關系是：F＝ω2R

    為方便起見，F(xiàn)常用相對離心力也就是地心引力的倍數(shù)表示。即把F值除以重力加速度g（約等于9.8m/s2.）得到離心力是重力的多少倍，稱作多少個g。例如離心機轉頭平均半徑是6cm，當轉速是60000

    r/min時，離心力是240000×g，表示此時作用在被離心物質上的離心力是日常地心引力的24萬倍。因此，轉速r/min和離心力g值之間并不是成正比關系，還和半徑有關。同樣的轉速，半徑大一倍，離心力（g值）也大一倍。轉速（r/min）和離心力（g值）之間的關系可用下式換算：

    式中：r為半徑（cm），g為離心力（g值）

    （三）超速離心機的離心方法

    用離心方法分離生物大分子和亞細胞物質的基本原理是根據(jù)它們在液體介質中或者沉降速度不同而形成不同的區(qū)帶，或者它們的密度不同而停留在液體介質中不同的位置而把它們一一分開。

前者是沉降速度法，應用該法時液體介質的最大密度要小于樣品中最小顆粒的密度，離心時選用高轉速和短時間；后者是沉降平衡法，應用該法時液體介質的最大密度要大于樣品中最小顆粒的密度，離心時選用較低轉速和較長時間。實際操作有幾種形式：
    1.差速離心這種方法是選擇不同轉速的離心，分別分離各個不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液，在高速離心上清沉降中等顆粒，最后超速離心上清沉降小顆粒。采用逐級提高離心力分離上情液的方法，把不同大小的顆粒分開。

    這種方法比較簡單，方便。分離的組份沉到管底，因此可以迅速濃縮所要的組份，減少體積。但回收率和純度是有矛盾的，要提高回收率，勢必提高轉速或延長離心時間，這樣大小相近的顆粒也會沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品。

    2.速度區(qū)帶（或速度梯度）離心本法是將樣品放在一個連續(xù)的密度梯度液體上，通過離心，大顆粒沉降快，小顆粒沉降慢。經(jīng)過一段時間，相同的顆粒就在同一深度形成一條帶子，因此把各種組份分開來。它適用于分離密度相同、而大小不同的物質，如不同的蛋白質組份密度都差不多，但分子量不一樣，用本法很容易將其分

    開。但對密度不同、大小類似的物質則不易分離。蔗糖梯度是一種常用的介質。用不同濃度的蔗糖溶液（5%-60%）配成梯度，用于梯度離心。再分別進行收集處于不同區(qū)帶里的各個組份。

    （四）保養(yǎng)注意事項

    1.清潔離心機腔體和轉頭，并擦干腔內冷凝水。

    2.使用完后要打開門，直至腔內恢復常溫。

    3.離心之前要平衡樣品。

    4.離心之后要注意消毒和滅菌。

    5.根據(jù)需要選用tubes/bottles、adapters以及spacers，根據(jù)要求加樣品量。

    6.必要時預冷轉子。

    7.轉頭的維護和存放,注意保護底部的計數(shù)環(huán)。

    8.工具的準確使用和轉頭的正確安裝。

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